［技術(shù)要點］:

1.以上生物安全柜的指標中人員安全性、受試樣品安全性和交叉感染驗證需采用生物學方法驗證，生物學檢測驗證的目的是為了保證生物安全柜在使用中的安全性，這種驗證方法可以貼近真實的直接驗證安全柜的實際使用性能。其中對操作人員的保護驗證，是為防止試驗操作過程中產(chǎn)生的感染性微生物氣溶膠對工作人員的威脅；對試驗操作樣品的保護驗證，是為防止生物安全柜以外的污染物進入安全柜，對試驗樣品造成污染；交叉感染驗證，是為防止試驗操作過程中產(chǎn)生的生物氣溶膠造成試驗樣品間的交叉污染；

2.Ⅰ級生物安全柜不提供產(chǎn)品保護，工作面氣流為亂流，只進行人員保護試驗一項檢測；

3.Ⅱ級生物安全柜需進行人員、樣品、交叉污染保護三項檢測；

4.Ⅲ級安全柜前部封閉，工作面氣流為定向氣流，有局部的亂流，不需要進行人員、樣品保護和交叉污染試驗；

5.此外，生物安全柜還有一些其他性能指標主要是為了檢查安全柜的設(shè)計結(jié)構(gòu)性能、電路和物理性能等，包括振動幅值、柜體抗變形、工作臺面抗變形、柜體穩(wěn)定性、溫升、泄漏電流、接地電阻、耐電壓、絕緣電阻、報警和連鎖系統(tǒng)、紫外燈性能等。

垂直氣流平均風速在距離內(nèi)側(cè)壁板及工作窗100mm圍成的，工作臺面上方300mm處的平面區(qū)域內(nèi)測量垂直氣流的平均風速。測量點按行、列均為150mm的網(wǎng)格分布。若去除測量邊界后凈尺寸不等于15的整數(shù)倍，則允許修正測量點距離，但每列至少測量3點，每行至少測量7點。垂直氣流平均風速為各測量點讀數(shù)的算術(shù)平均值。具體的指標要求可參照標準JG 170-2005《生物安全柜》、YY 0569-2011《Ⅱ級生物安全柜》的相關(guān)要求。

工作窗口氣流平均速度常用的測試方法主要有兩種：風量罩檢測法、風速儀檢測法。

［技術(shù)要點］:

1.風量罩檢測法是采用風量罩測出工作窗口風量，再通過風量除以工作窗口面積計算出氣流平均風速，測量時將風量罩密封在安全柜的前窗操作口中心，風量罩兩側(cè)開口區(qū)域要密封；

2.風速儀檢測法是采用風速儀直接測量工作窗口斷面風速，測量時，將工作窗開口高度開到指定的操作高度。用風速儀在工作窗開口平面直接測量風速。測點的水平間隔為100mm，垂直方向分別距工作窗口上邊緣1/4工作窗口高度處和3/4工作窗口高度處，測點的平均值即為工作窗口氣流平均速度。

Ⅲ級生物安全柜手套口處的風速手套口風速是通過人為摘除Ⅲ級生物安全柜一只手套后，將風速儀探頭放在手套口的中心處，并記錄測量點的風速。測試之前，要保證生物安全柜已達到正常運行狀態(tài)，且生物安全柜的嚴密性、靜壓差及送風量應(yīng)均已通過檢測，并符合相關(guān)標準要求。

氣流流向氣流流向測試時，采用發(fā)煙管發(fā)生可視煙霧，通過觀察煙霧流向來驗證生物安全柜的氣流流向。氣流流向包括垂直氣流流向、觀察窗隔離效果氣流流向、工作窗口邊緣氣流流向和工作窗開口氣流流向。

［技術(shù)要點］:

1.垂直氣流驗證時，在II級生物安全柜工作表面中線上方高于工作窗口上沿100mm處，從可移動垂直窗一端到另一端發(fā)煙，垂直氣流方向煙霧應(yīng)為垂直氣流線，且無死角和回流；

2.觀察窗隔離效果氣流驗證時，在Ⅰ級、Ⅱ級生物安全柜觀察窗內(nèi)25mm處，在工作窗口上邊緣150mm處，從生物柜的一端向另一端發(fā)煙，氣流流向應(yīng)為垂直氣流線，不得有死角和回流；

3.工作窗口邊緣氣流驗證時，在Ⅰ級、Ⅱ級生物安全柜外38mm處，讓煙霧沿著工作窗開口的整個邊界擴散，煙霧應(yīng)進入安全柜內(nèi)部無外逸，且無穿越工作區(qū)氣流；

4.工作窗開口氣流流向驗證時，在I級、II級生物安全柜內(nèi)部，工作面上300mm，距工作窗口內(nèi)壁50mm到柜后側(cè)內(nèi)壁整個水平面上發(fā)煙，煙霧測試時應(yīng)無煙霧從窗口外逸。

靜壓差Ⅲ級生物安全柜與所在房間的相對壓差可用微壓差計直接測量。測試時，Ⅲ級生物安全柜應(yīng)已達到正常運行狀態(tài)，用微壓差計分別連接Ⅲ級生物安全柜內(nèi)部及實驗室環(huán)境便可直接測出Ⅲ級生物安全柜的靜壓差。Ⅲ級生物安全柜與所在房間之間的負壓值應(yīng)不低于120Pa。

潔凈度采用激光粒子計數(shù)器在生物安全柜操作面內(nèi)按要求布置的測點上測量空氣的含塵濃度。

［技術(shù)要點］:

1.采樣點數(shù)目應(yīng)根據(jù)生物安全柜操作面的面積確定采樣點數(shù)目，并均勻布點。

2.I級、II級生物安全柜內(nèi)部潔凈度要達到5級，Ⅲ級生物安全柜當操作需要保護的受試樣本時，潔凈度也要求達到5級。

噪聲生物安全柜正常運行時，采用聲級計在被測生物安全柜前壁面中心水平向外300mm，高度距工作臺面380mm處測量。

照度在操作面上，沿操作面內(nèi)壁面水平中心線每隔300mm設(shè)置一個測量點，與內(nèi)壁距離小于150mm時，不再設(shè)置。被測生物安全柜置于正常工作條件下，用照度計檢測各測量點。被測生物安全柜照度為各測量點照度的算術(shù)平均值。

高效過濾器完好性檢測排風高效過濾器作為生物安全柜的最重要的防護屏障之一，是防止有害生物氣溶膠排放至大氣的最有效防護手段。因此，我國標準GB 50346-2011《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》要求必須對三級和四級生物安全實驗室內(nèi)使用的隔離設(shè)備的排風高效過濾器進行原位檢漏[12]；而送風高效過濾器是生物安全柜內(nèi)部潔凈度的重要保障。

而確定高效過濾器是否有縫隙、孔眼而發(fā)生漏泄，是否完好無損。通常高效過濾器采用物理氣溶膠進行完好性檢測，高效過濾器的檢漏方法根據(jù)檢測方式不同主要分為掃描法檢漏和全效率法檢漏。

［技術(shù)要點］：

1.掃描檢測法是通過采樣探頭在過濾器下游表面2~3cm位置處沿過濾器的所有表面及過濾器與裝置的連接處如邊框等位置，以一定的速度移動測試局部區(qū)域的過濾效率，判斷過濾器是否發(fā)生泄漏。掃描法檢漏根據(jù)檢測儀器的測試原理不同分為光度計掃描法和計數(shù)掃描法。

其中光度計掃描法檢測氣溶膠常用“冷發(fā)生”方式，即將一定壓力壓縮空氣通入噴嘴產(chǎn)生多分散油性氣溶膠，如聚α烯烴（PAO）、癸二酸二辛酯（DOS）、癸二酸二酯（DESH）、鄰苯二甲酸二辛酯（DOP）、石蠟油、殼牌安定來礦物油等。然后通過掃描采樣頭在過濾器表面線性掃描并配合氣溶膠光度計測試各掃描點局部透過率，根據(jù)局部透過率限值判斷漏孔。

計數(shù)掃描法氣溶膠物質(zhì)較廣泛，除可選用上述氣溶膠外，還可以選擇PSL小球或大氣塵等非油性氣溶膠。掃描測試過程類似，測試儀器是粒子計數(shù)器，通過測試上、下游粒子數(shù)濃度，并根據(jù)相應(yīng)透過率限值或下游粒子數(shù)限值來判定泄漏。

2.對于無法采用掃描法檢漏的高效過濾器，需采用全效率法檢漏方式，即通過測試過濾器的整體效率來檢漏。全效率法檢漏時在過濾器上游注入氣溶膠，在上游和下游分別進行采樣，上、下游采樣必須經(jīng)過氣溶膠均勻性驗證，然后根據(jù)上、下游氣溶膠濃度計算過濾器的整體透過率，并與規(guī)定的整體泄漏限值比較來判斷泄漏，根據(jù)使用檢測儀器的測試原理不同也分為光度計全效率法檢漏和計數(shù)器全效率法檢漏[13]。

Ⅲ級生物安全柜箱體嚴密性檢測標準ISO 10648-2:1994[14]對硬質(zhì)隔離器的嚴密性進行了等級劃分，共劃定了4個等級，1 級最高，4級最低。目前Ⅲ級生物安全柜箱體嚴密性指標可采用ISO 10648-2:1994中的2級密封箱室（長期從事含有有害氣體的防護箱室）的期間檢驗指標，即箱體內(nèi)壓力低于周邊環(huán)境壓力250Pa下的小時泄漏率不大于凈容積的0.25%。根據(jù)2級密封等級，按標準ISO10648-2:1994要求應(yīng)采用壓力衰減法進行測試。

［技術(shù)要點］：

1.壓力衰減法的原理是在被測設(shè)備體積不變情況下利用被測設(shè)備內(nèi)壓力的衰減變化測試泄漏率。

2.由于密閉式隔離器普遍安裝有供人員操作的橡膠手套（部分安裝有半身式防護服），因為手套或半身式防護服柔軟富有彈性，導致動物隔離器在不同壓力下，其凈容積會產(chǎn)生變化。而采用壓力衰減法的前提條件就是要保證被測設(shè)備內(nèi)部容積保持不變，因此在使用壓力衰減法測試時應(yīng)采取必要措施固定手套或半身式防護服以防止其體積發(fā)生較大變化。

3.同時，也應(yīng)采取必要措施防止其因壓力過大或作用時間過長造成應(yīng)力損壞。

泄漏電流、接地電阻、耐電壓、絕緣電阻泄漏電流測試時，讓生物安全柜連續(xù)運行4h后，施加110%額定電壓，用泄漏電流測量儀測量機組外露的金屬部分與電源線之間的泄漏電流；接地電阻測試時，將被測生物安全柜所有的功能開關(guān)均置于“斷”位，用接地電阻測試儀測量接地端與可觸及的金屬部件之間的電阻值；耐電壓測試時，電氣強度測試歷時1min，經(jīng)受頻率為50Hz的基本正弦波的交流電壓，測試的部位為電源輸人端與金屬外殼之間。最初施加的電壓不超過規(guī)定值的一半，然后迅速上升到規(guī)定值，試驗期間不應(yīng)發(fā)生擊穿；絕緣電阻測試時，在施加500V直流電壓1min后進行絕緣電阻測量，在帶電部件與殼體之間值應(yīng)不小于2MΩ。

振動幅值及工作臺面抗變形為判斷使用者在操作生物安全柜時的振動結(jié)果，振動值應(yīng)達到要求的機械性能，以此減輕操作者的疲勞并預(yù)防振動導致精密組織培養(yǎng)試驗品的破壞。被測生物安全柜置于正常工作條件。將振動儀的振動傳感器牢固地固定在工作臺面的中心，振動儀的頻率從10Hz變化到10kHz，測量生物安全柜工作時的總振幅。

工作臺面抗變形試驗時，將面積為250mm×250mm、重量為23kg的測試負載均勻地施加于被測生物安全柜臺面中央，在載重條件下測量安全柜臺面前部邊緣中心至地面的距離。

負載及空載條件下安全柜臺面前部邊緣中心至地板的距離相等，可視為臺面無永久性變形。

紫外燈測試對于設(shè)置紫外燈的生物安全柜，必須對紫外燈定期檢查，以保證其能有效地殺死微生物。在將燈關(guān)閉冷卻后，要用70%的酒精擦拭燈泡表面。將其打開5min后，將紫外線感應(yīng)器放置于工作表面中心，照射的光在254nm波長處不應(yīng)少于40mW/cm2。